Опыт применения прибора "Rotor-Gene" ироизводства Corbett Research (Австралия) для ПЦР в режиме реального времени

Одним из самых информативных и высокотехнологичных методов лабораторной диагностики и, прежде всего, в молекулярной диагностике инфекционных заболеваний является метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени Метод основан на том, что в процессе накопления продуктов ПЦР происходит эквивалентное накопление сигнала флуоресценции. Это возможно благодаря присутствию в реакционной смеси специфическою флуоресцентного зонда, изменяющего свою способность к флюоресценции при накоплении продуктов амплификации.

В клинико-диагностической лаборатория Минскою консультативно-диагностического центра для молякулярно-диагностических исследований с октября 2008 используется термоцпклирующая система «Rotor-Сепе 6000» производства Corbett Research (Австралия), прибор, отвечающий требованиям, предъявляемым к приборной базе ПЦР в режиме реального времени. Вышеназванная система позволяет проводить амплификацию и детекцию с последующим количественным анализом содержания ДНК мишени или (и) геногниирования исследуемых образцов.

Основным конструктивными моментами «Roior-Gene 6000» является гермоцнк.тирование в потоке циркулирующего воздуха и постоянная длина оптического пути. Вращение ротора во время анализа со скоростью 400 оборотов в минуту не создает градиента концентраций, не мешает протеканию реакции, вместе с тем, препятствует образованию конденсата на крышках пробирок и устраняет пузырьки воздуха, попавшие в раствор при пипетировании. Таким образом, пробирки перед постановкой в прибор нет необходимости центрифугировать. Вращаясь в нагретом воздухе, все пробирки нагреваются и охлаждаются эквивалентно. Максимальная равномерность температуры, отсутствие краевых эффектов обеспечивают высокую точность получаемых данных, что является ключевым моментом при проведении НЦР-анализа, в особенности его количественного варианта. Постоянная длина оптического пути в ходе измерения для каждого из анализируемых образцов обеспечивает идентичность измерения независимо от положения образца в роторе. Эти два преимущества в сочетании с гибкими алгоритмами обработки данных программным обеспечением прибора

определяют высокое качество результатов исследования при его использовании. Программное обеспечение на русском языке делает его доступным для широкого круга пользователей.

Из вышесказанного следует, что обеспечиваемые прибором режим термоциклирования, детекции флуоресцентного сигнала и обработки данных дают возможность получения результатов количественного ПЦРанали.за в диапазоне концентрации ДТЖ-мишени, соответствующем линейному диапазону используемой тест-системы.